兩路精神的精神內涵是一不怕苦、二不怕死；頑強拼搏、甘當路石；軍民一家、民族團結。
2014年8月，在川藏公路、青藏公路（簡稱“兩路”）建成通車60周年之際，習近平總書記作出重要批示，對修筑、養護“兩路”時鑄就的“兩路”精神進行了高度概括和精確凝練：“一不怕苦、二不怕死，頑強拼搏、甘當路石，軍民一家、民族團結”，要求進一步弘揚“兩路”精神，助推西藏發展。2020年11月，習近平總書記對川藏鐵路開工建設作出重要指示，強調發揚“兩路”精神和青藏鐵路精神，高質量推進工程建設。
一不怕苦、二不怕死，體現了忠誠事業、不畏艱險的英雄情懷。
“兩路”精神形成于20世紀50年代修筑川藏、青藏公路的實踐中，當時的歷史條件和筑路環境有著苦和險的突出特征，筑路軍民不怕艱苦、不畏艱險，完成了一個又一個“不可能完成的任務”。川藏公路沿線遍布高山峽谷、激流險灘和沼澤，地震滑坡、泥石流、雪崩等災害頻發，在這里筑路養路無比艱辛。青藏公路沿線的多座大山平均海拔在4000米以上，筑路軍民時刻都面臨著高寒、缺氧、輻射強、氣候多變、多年凍土不化等惡劣的施工條件。外國探險家曾斷言，從可可西里到唐古拉山口的數百里地帶，是“死神主宰的地區”。號稱“川藏公路第一險”的二郎山，陰面潮濕，時常下雨，山洪、塌方、泥石流時有發生。海拔5000多米的雀兒山，冬季氣溫極為寒冷，筑路官兵在吃飯時，往往一碗飯才吃到一半，另一半就凍成了冰疙瘩。怒江天險的懸崖峭壁長達數十公里，稍不留神就可能掉入湍急的江流之中。就是在這樣的環境下，筑路軍民硬是在“人類生命禁區”奪取了世界公路建設史上的驚人業績。
在高原劇烈勞動，“兩路人”心臟病患者劇增，不少人甚至獻出了寶貴的生命。為征服二郎山天險，筑路大軍以“鐵打漢”和“堅如鋼”的毅力一往無前。為了勘測到拉薩的線路，勘察隊在原始森林里露宿，在山洞里冒著風寒過夜，翻越200多座大山，徒步行走10000多公里，歷盡千難萬險。在青藏公路修進昆侖山時，慕生忠將軍對身邊的同志說：“假如我死在青藏線上，就把我埋在這里！”他還在一個鐵鎬上刻上“慕生忠之墓”五個字。在他眼里，“人都免不了一死，但人生的死大致有三種，無非是老死、病死、戰死。我不愿意躺在床上慢慢老死、病死，而愿意死在戰斗的崗位上。”筑路艱辛，養路亦難！在川藏線雀兒山路段，被譽為“雪山鐵人”的養路工陳德華立下誓言：“我就是死了，也要化成個路標，戳在這山上！”
頑強拼搏、甘當路石，體現了甘于吃苦、樂于奉獻的高尚情操。
“兩路”修筑之初，中國正處在一窮二白、積貧積弱的狀態，盡管其間國家用于交通運輸業的投資占全國投資總額的比例很高，但如何打通前往西藏的“天路”，仍是擺在全體筑路人面前的巨大難題。西藏距離內地遙遠，既不通車，又不通航，筑路部隊的供應陷入極端困難的境地，多次出現糧食不足、吃不飽飯的情況，有時只能靠挖野菜維持生命。在缺乏雨衣、大米和帳篷的日子里，“兩路人”風餐露宿、爬冰臥雪，過著極端艱苦的生活。當時在世界屋脊修建“天路”，需要極高的技術水平和豐富的建設經驗，但這兩點恰恰受到歷史條件的嚴重制約。施工部隊在穿越高山峽谷時，往往連一張正確的地圖都沒有，不得不花更多的時間和精力來勘測，有時為尋找一條比較理想的路線，需要在崇山峻嶺中跋涉10000多公里，翻越200多座雪山；由于多方面的科學知識幾乎空白，也沒有任何現成資料，施工隊伍只能邊干邊摸索。施工工具也極為簡陋，大量使用鐵錘、鐵鍬、鋼釬、鎬頭，有時甚至連這樣簡單的工具也缺乏。
康藏公路筑路政委穰明德說過，“把修好的路留給別人，把沒有路的地方留給自己”，“兩路人”把無私奉獻的精神詮釋得淋漓盡致。川藏公路跨過10多座有名的大山，打通每一座大山都要經歷數不盡的磨難。有的戰士集中精力揮動鐵錘打炮眼，雙手虎口被震裂卻毫無覺察；有的戰士手握鋼釬時間太久，手和冰冷的鋼釬凍在一起；有的戰士得了雪盲，眼睛紅腫得睜不開也不肯休息，硬是要堅持上工……第53師指戰員喊出“讓高山低頭，叫河水讓路”的口號，在黨的八大二次會議上得到毛澤東同志的充分肯定，成為鼓舞全國人民闖關奪隘的強大精神動力。
軍民一家、民族團結，是我們不斷從勝利走向勝利的重要法寶。
10多萬筑路大軍里，既有軍人也有民眾，各民族在“兩路”上攜手鑄就了不朽功績，共同創造了“兩路”精神，書寫了軍民團結、民族團結的重要篇章。習近平總書記強調，“全黨全軍全國各族人民要大力弘揚軍愛民、民擁軍的光榮傳統，不斷發展堅如磐石的軍政軍民關系”“鑄牢中華民族共同體意識，加強各民族交往交流交融，促進各民族像石榴籽一樣緊緊抱在一起，共同團結奮斗、共同繁榮發展”。傳承“軍民一家、民族團結”的“兩路”精神，就要堅持軍民團結一條心、中華民族一家親，匯聚起全面建設社會主義現代化國家、實現中華民族偉大復興的磅礴偉力。
“兩路”的修筑和養護史，就是漢藏等各民族軍民的團結奮斗史。黨中央一開始就嚴格要求進藏部隊以人民群眾的利益為主，始終做到“不吃地方”和“決不侵擾老百姓”。毛澤東同志還手書了“為了幫助各兄弟民族，不怕困難，努力筑路”，送給十八軍。施工部隊反復學習和嚴格遵守民族政策文件，贏得了各民族同胞的信任與支持。解放軍進藏后，堅決貫徹執行黨的民族政策和宗教政策，充分尊重各地風俗習慣和各民族同胞，平等對待每一位農牧民，讓他們深切感到換了人間。解放軍不僅幫助各民族同胞筑路，還長期開展“送科技、送教育、送文化、送法律、送健康”愛民助民活動，帶動當地經濟社會發展。西藏人民把“兩路”稱為“幸福路”“金橋”“彩虹”，他們動情地說：“解放軍帶來的好處，就像春天草原上長出來的草一樣多。”在修筑“兩路”的豐碑上，藏族等各民族人民也作出了巨大貢獻。他們與解放軍一起施工，打破民族內部的封建阻隔，在泥沼冰河、陡坡懸崖、風雪深山中披星戴月、夜以繼日地奔走，給筑路工地源源不斷運送各種物資。
“軍民一家、民族團結”的精神，引領一代又一代“兩路人”成功修筑和養護了川藏、青藏公路，道路的修通和改善又進一步加深了漢族、藏族和其他各族人民的交往聯系，從根本上促進了軍民團結和民族團結。